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瓊脂糖凝膠2B Sepharose 2B使用說明書

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產品名稱: 瓊脂糖凝膠2B

英文名稱: Sepharose 2B

外觀:本品為乳白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。

包裝:產品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小”等內容。

貯存:產品應密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃(20%乙醇)

注意事項:本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中

運輸:運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。

保質期 :5年

 

2. 理化指標

項       目

指       標

基質

 

 

2%瓊脂糖凝膠

排阻極限

70000~40×106 (球蛋白)

形狀

球型

粒徑

60~200 μm

zui高流速

110 cm/h*

耐壓

0.03 MPa

耐熱

pH7水中45℃24h

pH適用范圍

4~9 (長時間), 3~11(短時間,在位清洗)

化學穩定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍

*檢測條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl

 

應用:本產品為傳統的瓊脂糖介質,非特異性吸附低,回收率高,可多次重復使用等特點,用于分子量差異大、對分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。下面簡要介紹介質的使用過程

 

裝柱

凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。

⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

⑵選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。不要劇烈攪動,以免攪壞微球。

⑶將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。

⑷  用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。

⑸ 打開蠕動泵,讓緩沖液緩慢流過,使柱床穩定。

⑹用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

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