本試劑盒用于測定微生物樣本中ATP酶(ATPase)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人ATP酶(ATPase)水平。用純化的人ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入ATP酶(ATPase),再與HRP標記的ATP酶(ATPase)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ATP酶(ATPase)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人ATP酶(ATPase)濃度。
微生物ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析試劑盒組成
130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(2000nmol/L)0.5ml×1瓶
3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶
4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。微生物ATP(ATPase)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
1000nmol/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
500nmol/L4號標準品150µl的5號標準品加入150µl標準品稀釋液
250nmol/L3號標準品150µl的4號標準品加入150µl標準品稀釋液
125nmol/L2號標準品150µl的3號標準品加入150µl標準品稀釋液
62.5nmol/L1號標準品150µl的2號標準品加入150µl標準品稀釋液