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　　1.細(xì)胞培養(yǎng)過程中的應(yīng)用

　　細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程主要包括四個(gè)步驟：準(zhǔn)備、材料提取、培養(yǎng)和冷凍恢復(fù)。為了儲存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變細(xì)胞或細(xì)胞株，冷凍細(xì)胞。冷凍溫度一般為196℃液氮溫度，細(xì)胞收集到冷凍儲存管中，加入含有保護(hù)劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養(yǎng)液，以一定的冷卻速度冷凍，最后儲存在液氮中。在極低的溫度下，細(xì)胞的保存時(shí)間幾乎是無限的。

　　二、胚胎冷凍儲存技術(shù)

　　胚胎冷凍儲存技術(shù)是指在低溫環(huán)境下使用低溫保護(hù)劑儲存胚胎的技術(shù)。該技術(shù)是由20世紀(jì)下半葉人工授精技術(shù)的廣泛應(yīng)用引起的。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理是低溫降低了胚胎中的變質(zhì)反應(yīng)速度，溫度越小，胚胎保存時(shí)間越長。

　　目前已開發(fā)出慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法、玻璃化冷凍法等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下：

　　①將胚胎在室溫下發(fā)人25%玻璃化溶液(VS液)中預(yù)處理15分鐘。

　　②將預(yù)處理后的胚胎存放在高濃度(75%190%)的VS液中20-40分鐘。

　　③將經(jīng)過兩步抗凍劑處理的胚胎直接儲存在液氮中。

　　此外，還可以用液氮罐儲存菌種、疫苗、骨組織、精子等成分，可以達(dá)到很好的長期儲存效果。