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熱原（pyrogen）指在臨床上能使哺乳動物產生熱原反應的物質。關于熱原的定義在學術上尚有爭論。熱原是否就是內毒素在學術上也有爭議。但在藥檢的范疇，可以說無內毒素就是無熱原，檢測內毒素就是檢測熱原。

隨著科學的進步，通過對鱟血液細胞溶解物及內毒素的深入研究發現，鱟血液細胞的溶解物包含了與內毒素反應所需的全部凝集因子，它們與內毒素的反應是一種復雜的酶促反應。

1964年，Bang和Levin首先提出鱟血凝集的初步機制，并用鱟試驗檢測內毒素。1968年，Marchalon精制成功鱟試劑，此后鱟試劑作為一種檢測內毒素血癥的簡便而靈敏的方法逐步推廣于臨床。

從上文鱟試劑（包含有凝固酶原及凝固蛋白原）與內毒素的反應機制可以看出，這種凝集反應是一系列復雜的酶促反應，任何因素影響到反應的任一過程的正常進行，都會影響到檢查結果的準確性，即出現所謂“假陰性”或“假陽性”的結果。通常的影響因素有pH值、離子濃度以及某些干擾成分。只有證實檢品對凝集反應無干擾之后，檢查的結果才是可信的。

最初人們以為鱟試劑是專一對內毒素反應的試劑。隨著研究的深入，人們發現鱟試劑除了含有能被內毒素激活的凝集因子外，還存在著能被其他物質激活的G因子。活化的G因子同樣可以激活凝固酶原，從中可以看出，鱟試劑存在“旁路”激活路線。通常稱由“旁路”反應而致的陽性結果為細菌內毒素的“假陽性”。

近期的研究證實，(1,3)-β-葡聚糖類物質（如真菌多糖）能激活益試劑的旁路。此外，1981年在美國的內毒素標準品及鱟試劑應用國際會議上，Carson等提出了一個“鱟試劑反應物”（LAL-reactivematerial，LAL-RM）的術語，認為除了(1,3)-β-葡聚糖外，還存在著LAL-RM這類物質可以激活鱟試劑旁路。LAL-RM的存在是由于在用鱟試劑檢查人工腎血液透析沖洗液中的內毒素時出現呈弱陽性而發現的。