Human TNF-α ELISA用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人 TNF-α 單克隆抗體預包被在高 親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經過孵育，樣本 中存在的 TNF-α 與固相抗體和檢測抗體結合。

Human TNF-α ELISA試劑準備:

檢測前請將所有的試劑、樣本恢復至室溫。 如果濃縮的試劑出現結晶，37℃溫浴，直至結晶全部溶解。 1×洗液 吸取 20×濃縮洗液 50 ml 至 1 L 的量筒，加蒸餾水或去離子水至 1000 ml，輕輕混勻，避免泡 沫。 轉移至干凈瓶內。2 - 25℃貯存，1×洗液可穩定 30 天。 1×檢測緩沖液 吸取 10×濃縮檢測緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸餾水或去離子水至 50 ml，輕輕混勻，避 免泡沫。 2 - 8℃貯存，1×檢測緩沖液可穩定保存 30 天。 檢測抗體 稀釋前充分混勻。根據標準品和待測樣本的數量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的檢 測抗體。 注意：請在 30 分鐘內使用稀釋后的檢測抗體。 辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素 稀釋前充分混勻。 根據標準品和待測樣本的數量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的辣根過氧化物酶標記的 鏈霉親和素。注意事項：請在 30 分鐘內使用稀釋后的辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素。

Human TNF-α ELISA檢測原理：本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗人 TNF-α 單克隆抗體預包被在高 親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經過孵育，樣本 中存在的 TNF-α 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標 記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與 樣本中 TNF-α 的濃度成正比。加入終止液終止反應，在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定 吸光度值。

Human TNF-α ELISA介紹：TNF-α 對刺激物 (感染因子或組織受損) 產生應答后，在全身循環，激活中性粒細胞，改變血管內皮細胞的特性， 調控其它組織的代謝活性，以及通過誘導局部凝血作用展現腫瘤殺傷活性。 TNF-α 在關節組織和其它組織發生炎癥的發病機制具有重要作用。 zui近，越來越多的信息表明 TNF-α 也參與了 AIDS 的發病機制。TNF-α 的測定對于移植研究也非常有用。

Human TNF-α ELISA靈敏度: 人 TNF-α 的zui低可檢測濃度為 0.42 pg/ml。 10 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩倍 SD，計算zui低可檢測濃度

Human TNF-α ELISA標本要求：血清，血漿，細胞培養上清