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　　我們做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的時(shí)候經(jīng)常會(huì)碰到細(xì)胞抱團(tuán)的現(xiàn)象，有些時(shí)候細(xì)胞抱團(tuán)對(duì)我們下一步實(shí)驗(yàn)沒什么影響，但是當(dāng)影響實(shí)驗(yàn)的時(shí)候就簡(jiǎn)直抓狂。當(dāng)檢測(cè)細(xì)胞克隆形成率、鋪單克隆以及電轉(zhuǎn)等，這時(shí)候細(xì)胞要是抱團(tuán)了，得到的結(jié)果基本上都是不可靠的，那么細(xì)胞為什么會(huì)抱團(tuán)呢？又該如何避免？接下來(lái)讓我們一次性給小伙伴們講清楚吧！

　　細(xì)胞抱團(tuán)的原因可能有：

　　1、消化時(shí)間控制不當(dāng)

　　有些小伙伴不管什么細(xì)胞都消化3分鐘左右，然后用手拍打培養(yǎng)瓶使細(xì)胞成片脫落，但有些細(xì)胞消化不完quan，細(xì)胞和細(xì)胞之間的連接沒有分開，這個(gè)時(shí)候就拍打下來(lái)很容易造成細(xì)胞聚團(tuán)。

　　也不可消化過(guò)度，圓形的細(xì)胞容易聚堆，想要通過(guò)后面的步驟吹打分開是很難的！

　　正確做法：培養(yǎng)前充分了解細(xì)胞的特性，可向購(gòu)買細(xì)胞的廠家咨詢，也可在網(wǎng)上查詢確定細(xì)胞的最jia消化時(shí)間。

　　2、傳代時(shí)操作不當(dāng)

　　傳代時(shí)細(xì)胞吹打不均勻，沒有將細(xì)胞團(tuán)吹散。

　　吹打太用力造成細(xì)胞死亡，細(xì)胞死亡釋放的DNA與其他細(xì)胞形成黏性的細(xì)胞團(tuán)。

　　細(xì)胞離心速度過(guò)大或者離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

　　細(xì)胞長(zhǎng)的太滿才進(jìn)行傳代操作。

　　正確做法：

　　消化前加入適量緩沖液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行清洗，清除死亡的細(xì)胞團(tuán)和部分堆疊雜質(zhì)。

　　消化后吹打時(shí)上下左右吹打約10次左右，注意控制力度。

　　確定細(xì)胞正確的離心條件，嚴(yán)格按條件執(zhí)行。

　　細(xì)胞匯合度在80%~90%即可傳代。

　　3、細(xì)胞狀態(tài)不好

　　細(xì)胞狀態(tài)不好以及發(fā)生老化也可能造成細(xì)胞抱團(tuán)。

　　正確做法：及時(shí)換液或者傳代，檢查培養(yǎng)體系是否適合細(xì)胞。

　　4、細(xì)胞接種不當(dāng)

　　細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶/皿時(shí)細(xì)胞分布不均勻，或者細(xì)胞接種密度過(guò)高。

　　正確做法：

　　細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶后可按倒8字形狀搖勻（即∞）。

　　但對(duì)于像96孔板這種小型培養(yǎng)皿，需要在接種前把細(xì)胞混勻，接種后不可再搖，否則很容易全部聚集在孔板的中間。若已經(jīng)接種了發(fā)現(xiàn)不均勻，可用槍頭輕輕吹打混勻。

　　接種前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按照正確的接種密度接種。