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18064-022 反轉錄酶

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產品名稱: Superscript II Reverse
反轉錄酶
貨號: 18064-022
規格: 2000U
描述:(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA

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反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是*tRNA) 為引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根據堿基配對的原則,按5'-3'方向合成一條與RNA 模板互補的DNA 單鏈,這條DNA 單鏈叫做互補DNA (complementary DNA,CDNA)。

(Reverse transcripatse)是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)的酶。哺乳類C型病毒的轉錄酶和鼠類B型病毒的逆轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的逆轉錄酶則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的轉錄酶

轉錄酶都具有多種酶活性,主要包括以下幾種活性 。

①DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為*的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。

②RNase H活性;由轉錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNase H從RNA5′端水解掉RNA分子 。

③DNA指導的DNA聚合酶活性;以反轉錄合成的di一條DNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成第二條DNA分子。

除此之外,有些轉錄酶還有DNA內切酶活性,這可能與病毒基因整合到宿主細胞染色體DNA中有關。逆轉錄酶的發現對于遺傳工程技術起了很大的推動作用,目前它已成為一種重要的工具酶。用組織細胞提取mRNA并以它為模板,在逆轉錄酶的作用下,合成出互補的DNA(cDNA),由此可構建出cDNA文庫(cDNa library),從中篩選特異的目的基因,這是在基因工程技術中常用的獲得目的基因的方法 


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